說明書-氪爾美-MR0502-All-in-One Script RTpremix（with dsDNase）.pdf

【產品概述】

All-in-One Script RTpremix (with dsDNase)是一款含去除基因組酶 dsDNase 的一管式逆轉錄，可將 RNA 逆轉錄成為 cDNA，含有第一鏈 cDNA 合成所需的所有試劑，只需加入 RNA 模板和水即可進行逆轉錄反應。合成的第一鏈 cDNA（最長可達 15kb）可廣泛用于文庫構建、第二鏈合成、雜交、PCR 擴增、RT-qPCR 檢測等。

【產品組成】

a. 包含 Buffer、dNTPs、Random Hexamer Primer/Oligo (dT)20 Primer Mix。

b. 包含 Reverse Transcriptase、Ribonuclease Inhibitor 和 dsDNase。

【第一鏈 cDNA 合成】

1. 在 RNase-free 離心管中配制如下混合液，輕輕混勻并瞬離以下成分：

a. 為保證逆轉錄成功，請使用高質量 RNA 模板。

b. 5×Reaction Mix 在使用前需充分混勻。

2. 按照下表所示進行逆轉錄反應：

c. 復雜模板可以采用 25℃ 10 min，充分讓引物和模板結合。

3. 產物可立即用于 PCR 或 qPCR 反應，或在-20℃保存，并在半年內使用；長期存放建議分裝后在-70℃保存。cDNA 應避免反復凍融。

【注意事項】

防止 RNase 污染

請保持實驗區域潔凈；操作時需穿戴干凈的手套、口罩；實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證 RNase-free。